Навори Коронавирус (SARS-CoV-2) Маҷмӯаи мултиплекси PCR дар вақти воқеӣ
Ин маҷмӯаи хеле ҳассос ва барои истифода омодаи PCR дар формати лиофилизатсияшуда (раванди яхкунӣ-хушккунӣ) барои нигоҳдории дарозмуддат дастрас аст.Маҷмӯаро дар ҳарорати хонагӣ интиқол додан ва нигоҳ доштан мумкин аст ва барои як сол устувор аст.Ҳар як найчаи премикс дорои ҳама реагентҳои зарурӣ барои амплификацияи ПЗР мебошад, аз ҷумла транскриптазаи баръакс, полимерази Так, праймерҳо, зондҳо ва субстратҳои dNTPs.Ба он танҳо лозим аст, ки 13ул оби софшуда ва 5ул қолаби истихроҷшудаи РНК илова кунед, пас онро дар асбобҳои PCR иҷро кардан ва тақвият додан мумкин аст.
Мошини qPCR бояд ба талаботи зерин ҷавобгӯ бошад:
1. Муносиб 8 рахи найчаи PCR ҳаҷми 0,2 мл
2. Зиёда аз чор канали муайянкунӣ дошта бошед:
| Канал | Ҳаяҷон (нм) | Пардохт (нм) | Рангҳои қаблан калибршуда |
| 1. | 470 | 525 | FAM, SYBR Green I |
| 2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
| 3. | 571 | 621 | ROX, TEXAS-RED |
| 4 | 630 | 670 | CY5 |
Платформаҳои PCR:
7500Системаи PCR дар вақти воқеӣ, Biorad CF96, iCycler iQ™ Системаи муайянкунии PCR дар вақти воқеӣ, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
Мушкилоти интиқоли занҷири сарди реагенти кашфи кислотаи нуклеинии романи Коронавирус
Вақте ки реагентҳои муқаррарии муайянкунандаи кислотаи нуклеинӣ ба масофаи дур интиқол дода мешаванд, нигоҳдорӣ ва интиқоли занҷири сард (-20±5) ℃ барои фаъол боқӣ мондани биоактивии фермент дар реагентҳо зарур аст.Барои боварӣ ҳосил кардани он, ки ҳарорат ба меъёр мерасад, барои ҳар як қуттии реагенти санҷиши кислотаи нуклеинӣ ҳатто камтар аз 50 грамм якчанд килограмм яхи хушк лозим аст, аммо он танҳо ду ё се рӯз давом карда метавонад.Аз нуқтаи назари амалияи саноатӣ, вазни воқеии реактивҳои аз ҷониби истеҳсолкунандагон баровардашуда камтар аз 10% (ё хеле камтар аз ин арзиш) контейнерро ташкил медиҳад.Қисми зиёди вазн аз яхҳои хушк, бастаҳои ях ва қуттиҳои кафк меояд, бинобар ин хароҷоти нақлиёт хеле баланд аст.
Дар моҳи марти соли 2020, COVID-19 дар хориҷа ба таври васеъ паҳн шуданро оғоз кард ва талабот ба реагенти кашфкунандаи кислотаи нуклеинии нави Coronavirus ба таври назаррас афзоиш ёфт.Сарфи назар аз арзиши баланди содироти реагентҳо дар занҷири сард, аксари истеҳсолкунандагон ҳоло ҳам бо сабаби миқдори зиёд ва фоидаи зиёд онро қабул карда метавонанд.
Бо вуҷуди ин, бо такмили сиёсати миллии содиротии маҳсулоти зидди пандемия, инчунин такмил додани назорати миллӣ аз болои ҷараёни одамон ва логистика, тамдид ва номуайянӣ дар вақти интиқоли реагентҳо ба вуҷуд омадааст, ки боиси мушкилоти назарраси маҳсулот гардид. тавассути нақлиёт.Муддати дароз кашондани бор (мухлати боркашонй кариб ним мох хеле маъмул аст) хангоми ба мизочон расидани махсулот боиси зуд-зуд вайрон шудани махсулот мегардад.Ин аксари корхонаҳои содиротии реагентҳои кислотаи нуклеинро ба ташвиш овардааст.
Технологияи лиофилизатсияшуда барои реагенти PCR ба интиқоли реагенти кашфи кислотаи нуклеинии нави коронавирус дар саросари ҷаҳон кӯмак кард
Реагентҳои лиофилизатсияшудаи ПТР-ро дар ҳарорати хонагӣ интиқол додан ва нигоҳ доштан мумкин аст, ки ин на танҳо арзиши нақлиётро коҳиш медиҳад, балки мушкилоти сифатро, ки дар ҷараёни интиқол ба вуҷуд омадааст, пешгирӣ мекунад.Аз ин ру, лиофилизациям реагент воситаи бехтарини халли проблемам кашондани экспорт мебошад.
Лиофилизатсия ях кардани маҳлулро ба ҳолати сахт ва сипас сублиматсия ва ҷудо кардани буғи обро дар ҳолати вакуум дар бар мегирад.Маҳлули хушкшуда дар зарфе бо ҳамон таркиб ва фаъолият боқӣ мемонад.Дар муқоиса бо реагентҳои маъмулии моеъ, реагенти пурраи лиофилизатсияшудаи кашфи кислотаи нуклеинии романи коронавирус, ки аз ҷониби Liming Bio истеҳсол шудааст, дорои хусусиятҳои зерин мебошад:
Устувории гармии ниҳоят қавӣ:он метавонад бо табобати истода дар 56 ℃ барои 60 рӯз, ва морфология ва самаранокии реагент бетағйир боқӣ мемонад.
Нигоҳдорӣ ва интиқоли ҳарорати муқаррарӣ:ба занҷири сард лозим нест, пеш аз кушодан дар ҳарорати паст нигоҳ доштан лозим нест, фазои нигоҳдории сардро пурра озод кунед.
Ба истифода омода:лиофилизатсияи ҳама ҷузъҳо, лозим нест ба конфигуратсияи система, пешгирӣ аз талафоти ҷузъҳои дорои часпакии баланд ба монанди фермент.
Ҳадафҳои мултиплекс дар як қубур:Ҳадафи кашф гени нави коронавируси ORF1ab, гени N, гени S-ро фаро мегирад, то аз геновариатсияи вирус пешгирӣ кунад.Барои кам кардани манфии бардурӯғ, гени RNase P инсон ҳамчун назорати дохилӣ истифода мешавад, то эҳтиёҷоти клиникиро барои назорати сифати намуна қонеъ гардонад.
